Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 5:33 min • July 8th, 2025
Pour un test de microneutralisation, prendre une plaque multipuits contenant du sérum humain inactivé par la chaleur et dilué en série avec des concentrations décroissantes d’anticorps neutralisants spécifiques de la grippe.
Introduire des virus grippaux pathogènes. Les anticorps sériques interagissent avec les virus et les neutralisent ; Cependant, des dilutions sériques plus élevées montrent une neutralisation limitée du virus.
Grainez avec des cellules rénales canines de Madine-Darby, ou cellules MDCK, surexprimant les résidus d’acide sialique humain à leur surface.
Dans la dilution plus élevée, les virus grippaux non neutralisés fusionnent avec l’acide sialique des cellules, libérant le génome viral dans le cytoplasme cellulaire.
Les gènes viraux sont transcrits et traduits en protéines virales et en nucléoprotéines au sein de la cellule hôte.
Traiter avec une forte concentration d’acétone pour la fixation et la perméabilisation.
Introduire des anticorps primaires qui interagissent avec les nucléoprotéines virales.
Superposition avec des anticorps secondaires conjugués à des enzymes qui interagissent avec les anticorps primaires. Laver et traiter avec le substrat de l’enzyme, p
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