Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
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Procurez-vous des disques foliaires d’Arabidopsis thaliana. Immergez-les dans des puits à microplaques contenant de l’eau doublement distillée pour éviter la dessiccation.
Incuber les disques pour permettre la récupération des blessures.
Après l’incubation, retirez l’eau. Ajoutez un mélange réactionnel contenant des peptides dérivés de bactéries, de l’enzyme peroxydase de raifort et du luminol.
À l’aide d’un lecteur de microplaques, mesurez la luminescence au fil du temps.
Les récepteurs de reconnaissance de formes, ou PRR, sur les cellules végétales, se lient aux peptides bactériens, qui sont des motifs moléculaires associés aux microbes.
De plus, le PRR s’associe à son co-récepteur, subissant une phosphorylation mutuelle, activant des protéines kinases de type récepteur et provoquant un afflux intracellulaire de calcium.
Ceci, à son tour, active l’homologue de l’oxydase respiratoire transmembranaire, ou protéines RBOH.
Les RBOH activés catalysent la production d’espèces réactives de l’oxygène extracellulaires, ou ROS, provoquant une explosion oxydative. De plus, les ROS sont convertis en peroxyde d’hydrogène.
La peroxydase de raifort utilise du peroxyde d’hydrogène pour oxyder le
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