Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:03 min • July 8th, 2025
Commencer avec une plaque multi-puits contenant un liquide de lavage broncho-alvéolaire de souris comprenant une population de cellules immunitaires colorées avec un colorant fluorescent vert.
Introduire des anticorps Fc pour bloquer les récepteurs Fc des cellules immunitaires.
Ajoutez un cocktail d’anticorps distincts marqués au fluorophore ciblant des marqueurs cellulaires spécifiques. Retirez les anticorps non liés et remettez les cellules en suspension dans un tampon.
À l’aide de la cytométrie en flux, identifiez les singulets à faible fluorescence, indiquant les cellules vivantes.
Illuminer les cellules à 488 nanomètres, ce qui fait que les cellules émettent une fluorescence rouge corrélée aux cellules exprimant CD11c.
Au sein de la population CD11c élevée, avec des filtres de longueur d’onde appropriés, identifier les protéines marqueurs cellulaires MHC-II sur les cellules dendritiques et SiglecF sur les macrophages.
Dans la population CD11c faible, l’expression de CD3 sur les lymphocytes T et de CD19 sur les lymphocytes B permet leur identification.
Illuminez les cellules à 405 nanomètres, émettant une fluorescence bleue, signifiant les neutrophiles exprimant CD11b.
L’illumi
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