Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 6:08 min • July 8th, 2025
Prenez une plaque multi-puits contenant des mycobactéries. Ajouter des concentrations croissantes de composés d’essai dans les puits.
couver. Selon l’action du composé sur les mycobactéries, il peut soit inhiber la croissance mycobactérienne, montrant une activité bactériostatique, soit éliminer les mycobactéries, démontrant une activité bactéricide.
Transférez les aliquotes de puits dans une microplaque de gélose à gésazurine au charbon de bois, ou CARA, contenant de la gélose avec du charbon actif pour absorber le composé d’essai, évitant ainsi les effets de rémanence.
couver. L’activité bactériostatique du composé inhibe la réplication mycobactérienne, tandis que l’activité bactéricide réduit la viabilité mycobactérienne.
Ajoutez un tampon, de la résazurine et un tensioactif non ionique pour disperser la résazurine dans les puits.
Chez les mycobactéries métaboliquement actives, les déshydrogénases réduisent la résazurine de couleur bleue et faiblement fluorescente en une résorufine rose et fluorescente.
À l’aide d’un lecteur de microplaques, mesurez la fluorescence de la résoruphine dans les puits.
L’absence de fluorescence de la résorupine indique l’activité bactéricide du comp
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