Un test in vitro pour examiner l’augmentation de l’infection virale dépendante des anticorps
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 5:35 min • July 8th, 2025
Prenez une microplaque avec des dilutions en série d’un échantillon de sérum contenant des anticorps contre le virus Zika.
Ajoutez des particules de virus rapporteur de la dengue ou RVP et incuberez.
Les RVP modifiés comprennent une enveloppe avec des protéines structurelles et une nucléocapside contenant de l’ARN génomique, codant pour une protéine fluorescente.
L’homologie structurelle des protéines d’enveloppe des virus de la dengue et du virus Zika fait que les anticorps réagissent de manière croisée avec les RVP, formant ainsi un complexe.
Ajouter des cellules leucémiques humaines non autorisées à l’infection par les VPR.
Les cellules possèdent des récepteurs Fc qui reconnaissent les anticorps liés aux RVP, facilitant l’entrée des RVP à l’intérieur des endosomes - appelée renforcement dépendant des anticorps ou ADE.
Granulez les cellules et jetez le surnageant contenant des RVP non internalisés. Ajoutez un milieu de croissance et incuberez.
La fusion dépendante du pH de la RVP et des membranes endosomiques libère la nucléocapside, qui se désassemble pour libérer de l’ARN génomique, permettant l’expression de la protéine fluorescente.
Fixez les cellules et analysez-les à l’aide
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques