Les effets du stress de cisaillement sur les plaquettes traitées avec des anticorps contre les récepteurs mécanosensoriels

Commencez avec une plaque multi-puits contenant du plasma riche en plaquettes. Les plaquettes expriment des complexes mécanorécepteurs de surface, qui répondent aux stimuli mécaniques.

Le complexe mécanorécepteur contient le domaine de liaison au ligand extracellulaire et la région macro-glycopeptide liée au domaine mécanosensoriel.

Introduire des anticorps anti-mécanorécepteurs, en se réticulant avec les domaines de liaison aux ligands des récepteurs sur les plaquettes opposées.

Placez une gouttelette de suspension de plasma traitée par anticorps entre les assemblages du viscosimètre.

Appliquer une contrainte de cisaillement, simulant la force mécanique, en éloignant les récepteurs liés aux anticorps des plaquettes, conduisant à la dissociation de la région macro-glycopeptide du domaine mécanosensoriel.

Cela déclenche un changement conformationnel dans le domaine mécanosensoriel, activant les plaquettes et entraînant l’expression de marqueurs de surface.

Transférez la suspension plaquettaire cisaillée dans un nouveau puits à l’intérieur de la plaque multipuits.

Introduisez un cocktail de molécules spécifiques aux marqueurs marqués au fluorophore qui interagissent avec les marqueur