Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:49 min • July 8th, 2025
Prenez une suspension fécale de souris composée de bactéries lactiques, ou LAB, qui produisent de la bactériocine, un peptide antimicrobien, et inoculez-la dans un milieu de gélose molle sélectif LAB préchauffé.
Versez le milieu dans une plaque de gélose en formant la première couche.
Superposez une deuxième couche de gélose et incuberez.
La première couche favorise sélectivement la croissance des LAB, permettant aux molécules de bactériocine sécrétées de se diffuser vers l’extérieur des colonies dans le milieu environnant.
La deuxième couche contient un milieu acellulaire qui permet la diffusion de la bactériocine et empêche la croissance des colonies de LAB à la surface.
Maintenant, versez une troisième couche de gélose contenant une souche sensible à la bactériocine.
Les bactéries qui se développent dans la troisième couche rencontrent la bactériocine qui se diffuse à partir des couches inférieures.
La bactériocine perturbe la membrane cellulaire des bactéries sensibles, perturbant l’homéostasie cellulaire et entraînant la mort cellulaire, visible sous la forme d’une zone claire sur la troisième couche.
Mesurez le diamètre de la zone pour évaluer la puissance de la bactériocine.
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