Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
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Prenez un insert de membrane contenant une monocouche épithéliale irradiée aux rayons X.
Placez l’insert de membrane dans un puits contenant des cellules mononucléées du sang périphérique, ou PBMC - des cellules immunitaires qui sécrètent des cytokines et d’autres molécules de signalisation.
Placez la résistance électrique transépithéliale, ou électrodes TEER, dans l’insert de la membrane.
Appliquez un faible courant électrique et mesurez la résistance pour évaluer la perméabilité monocouche régulée par des jonctions serrées.
Les jonctions serrées sont des protéines transmembranaires liées au cytosquelette par des protéines d’échafaudage.
Ensemble, ces protéines jonctionnelles forment une barrière robuste entre les membranes cellulaires, limitant le passage des grosses molécules et des agents pathogènes.
Les protéines jonctionnelles intactes entravent la circulation du courant électrique, ce qui entraîne un TEER élevé, indiquant une perméabilité monocouche normale.
L’exposition aux rayons X réduit les niveaux de protéines jonctionnelles, augmentant la perméabilité des monocouches et abaissant la TEER.
De plus, les molécules de signalisation des cellules irradiées activent des PBMC
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