L’immunohistochimie pour étudier la relation entre les macrophages et les cellules immunitaires infiltrées

Commencez par une lame contenant des coupes de biopsie de l’artère temporale fixées au formol, déparaffinisées et réhydratées avec des cellules immunitaires infiltrées, y compris des lymphocytes et des macrophages.

Les macrophages activés expriment le récepteur bêta du folate ou FR-β - un marqueur lié à la maladie, différenciant les macrophages des autres cellules immunitaires.

Transférez la lame dans un tampon préchauffé pour récupérer les récepteurs de surface.

Traitez la section avec du peroxyde d’hydrogène, bloquant l’activité de la peroxydase intracellulaire.

Introduire un mélange d’anticorps primaires ciblant CD3, CD68 et FR-β, qui se lient aux cellules immunitaires exprimant ces protéines.

Ajoutez des anticorps secondaires biotinylés, interagissant avec les anticorps primaires, et lavez.

Superposez avec des enzymes conjuguées à la streptavidine qui se lient à la biotine.

Traiter avec un substrat chromogène qui interagit avec les enzymes, produisant des précipités bruns localisés.

Introduisez une contre-coloration - l’hématoxyline, colorant les noyaux en bleu.

Identifier au microscope de petites cellules rondes et colorées en brun comme des lymphocytes exprimant CD3 et de gra