Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
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Commencez avec une parabole d’imagerie à base de verre contenant une suspension de neutrophiles humains – ou cellules immunitaires – et visualisez-la sous un système d’imagerie par fluorescence.
Introduisez des conidies rapporteures d’Aspergillus fluorescentes génétiquement modifiées - ou des spores fongiques, et capturez des images à intervalles réguliers jusqu’à 6 heures.
Les spores fongiques expriment des protéines fluorescentes rouges et sont marquées à l’extérieur avec des fluorophores magenta non dégradables, ce qui permet de distinguer les cellules mortes des cellules vivantes.
Pendant l’incubation, les neutrophiles interagissent avec les molécules associées aux agents pathogènes sur les conidies par le biais de récepteurs de reconnaissance de formes, facilitant ainsi leur engloutissement dans un phagosome.
Plus tard, le phagosome fusionne avec le lysosome contenant l’enzyme, formant un phagolysosome.
À l’intérieur du phagolysosome, les espèces réactives de l’oxygène et les enzymes dégradent les conidies.
Au cours de l’imagerie de cellules vivantes, au point temporel initial, une fluorescence rouge et magenta intense dans le phagosome des neutrophiles indique la présence de
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