Un test moléculaire pour quantifier les virus de la grippe A et B
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:49 min • July 8th, 2025
Prenez un système de détection moléculaire contenant un récepteur d’échantillon pré-rempli, une cartouche de transfert et une base de test.
La base de test comprend des tubes réactionnels contenant des amorces T1 et T2 avec des sites d’entaille et des régions de reconnaissance de la grippe A et B, un mélange d’enzymes et des balises moléculaires avec un fluorophore et un extincteur.
Transférez les échantillons nasopharyngés contenant le virus dans un tampon de lyse du récepteur d’échantillons à la base d’essai.
La lyse virale libère de l’ARN, suivie de la liaison de l’amorce T2 à la région cible de l’ARN et de l’extension par transcriptase inverse.
L’autre amorce T2 se lie au même ARN, déplaçant le brin initialement étendu.
L’amorce T1 se lie au brin déplacé et l’ADN polymérase l’étend. Une enzyme d’entaille coupe son site, avec polymérisation et déplacement de brin, formant de l’ADN double brin.
Le processus se poursuit, amplifiant les duplex avec des surplombs monobrin.
Les balises moléculaires interagissent avec les surplombs, séparant le fluorophore du quencher et produisant une fluorescence pour quantifier les grippes A et B.
Pour commencer le processus de test, appuyez sur Ex
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques