Méthode de microtitration sur plaque pour évaluer la concentration minimale inhibitrice d’un antibiotique

0 vues • 5:16 min • July 8th, 2025

Prenez des plaques de microtitration contenant un antibiotique aminoglycoside dilué en série. L’une des plaques contient du NTBC, une drogue synthétique.

Introduisez Pseudomonas aeruginosa, une bactérie à Gram négatif, et incubez.

Les bactéries produisent de la pyomélanine – un pigment extracellulaire protecteur – dans les puits non traités par le NTBC, tandis que le médicament empêche la production de pyomélanine.

L’antibiotique cationique se lie aux lipopolysaccharides anioniques, ou LPS, sur la membrane externe bactérienne, déplaçant les ponts cationiques et déstabilisant la membrane.

Lorsqu’il pénètre dans la bactérie, l’antibiotique se lie au site aminoacyle, ou site A, dans la sous-unité ribosomique 30S.

L’antibiotique lié empêche la liaison de l’aminoacyl-ARNt et le mouvement ribosomique à travers l’ARNm, interférant avec la synthèse des protéines et inhibant la croissance bactérienne.

Après l’incubation, mesurez la densité optique de la culture pour évaluer la croissance bactérienne.

La concentration minimale d’antibiotiques qui empêche la croissance bactérienne est la concentration minimale inhibitrice ou CMI.

Des valeurs de CMI similaires pour les puits traités et non tra

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