Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:10 min • July 8th, 2025
Prenez des puits contenant des hydrogels de polyacrylamide de rigidité variable recouverts de collagène, imitant une matrice extracellulaire physiologique, ou ECM.
Ajoutez des cellules endothéliales microvasculaires qui forment des adhérences focales, ou FA – complexes médiant la liaison cellule-ECM – pour détecter la rigidité de l’hydrogel.
Les hydrogels plus rigides augmentent l’expression à la surface cellulaire de la vimentine, un composant du cytosquelette, par rapport aux hydrogels plus mous.
Ajoutez la bactérie Listeria monocytogenes, conçue pour exprimer une protéine fluorescente sous le promoteur de la protéine inductrice de l’assemblage de l’actine, ou ActA.
Centrifuger pour synchroniser le contact bactérien avec les cellules hôtes, et incuber.
Les bactéries se lient à la vimentine. Plus de vimentine sur les cellules hôtes plus rigides liées à l’hydrogel entraîne une plus grande adhérence bactérienne et une endocytose.
Ajoutez un antibiotique, éliminant les bactéries non internalisées.
Les bactéries internalisées sécrètent des toxines, rompant la membrane de l’endosome. L’échappement cytoplasmique active le promoteur ActA pour exprimer la protéine fluorescente, marquant a
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