Essai de microdilution en bouillon in vitro pour le criblage de composés antifongiques
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:48 min • July 8th, 2025
Prenez une plaque de microtitration et ajoutez des dilutions en série de nouveaux peptides antimicrobiens ou AMP, les composés de test.
Désignez un sous-ensemble de puits comme témoins de croissance et ajoutez de l’eau stérile sans les SAP.
Ajouter un champignon pathogène en suspension dans un milieu de culture dans des puits sélectionnés.
Ajoutez uniquement le milieu, dépourvu de champignon, dans un sous-ensemble de puits désignés comme témoins vierges.
Scellez la plaque et incubez dans des conditions humides propices à la croissance fongique.
Après l’incubation, observez les puits au microscope.
Les témoins de croissance semblent troubles en raison de la croissance fongique en l’absence de SAP. La turbidité de toutes les dilutions d’un AMP indique son inefficacité contre le champignon.
Les témoins à blanc, dépourvus de croissance fongique, semblent clairs. Comparez les puits d’essai avec les témoins à blanc pour confirmer l’absence de croissance, indiquant l’activité antifongique des AMP.
La concentration la plus faible d’un AMP qui inhibe la croissance fongique est appelée concentration minimale inhibitrice, ou CMI.
Le dosage de l’antifongique est effectué en trois exemplaires d
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques