Détermination du rôle des cellules de type neutrophile dans la sensibilité des cellules de lymphome à un médicament testé

Prenez une plaque multi-puits contenant des monocultures sphéroïdes 3D de cellules de lymphome, de globules blancs cancéreux et de co-cultures de lymphome et de cellules de type neutrophile dans une matrice de membrane basale.

Ajouter un médicament d’essai qui se lie à la tubuline intracellulaire et perturbe la polymérisation des microtubules, entraînant l’apoptose cellulaire.

Dans la co-culture, le contact direct avec les cellules du lymphome active les cellules de type neutrophile, induisant la sécrétion de cytokines.

Ces cytokines interagissent avec les récepteurs cellulaires du lymphome, déclenchant des cascades de signalisation en aval et régulant à la hausse l’expression des protéines anti-apoptotiques, favorisant ainsi la survie cellulaire.

Jetez le support. Ajouter un tampon de dissociation pour perturber l’adhésion cellulaire.

Grattez les sphéroïdes et incubez-les sous agitation. Transférez la suspension dans des tubes et continuez à agiter pour former des suspensions unicellulaires.

Introduire un cocktail d’anticorps conjugués aux fluorophores qui marque le lymphome et les cellules de type neutrophile.

Ajoutez de l’annexine V marquée au fluorophore et de l’iodure de propi