Un test pour évaluer l’immunodominance dans les réponses des lymphocytes T cytotoxiques

Commencez avec des cellules cibles marquées à un colorant fluorescent présentant un épitope peptidique non réactif ou des épitopes peptidiques dérivés d’un antigène tumoral avec une immunogénicité variable.

Ces cellules présentent des intensités de fluorescence variables - faible, intermédiaire et élevée - correspondant à la présentation d’épitopes peptidiques non réactifs, sous-dominants et immunodominants, respectivement.

Administrer la suspension cellulaire par voie intraveineuse à une souris sensibilisée.

Les cellules injectées se déplacent vers la rate contenant des populations de cellules immunitaires, y compris des lymphocytes T cytotoxiques ou CTL.

Dans la rate, les CTL interagissent avec les épitopes des cellules cibles.

Les épitopes immunodominants, étant plus immunogènes, déclenchent une réponse immunitaire CTL robuste, libérant des substances cytotoxiques et entraînant une lyse cellulaire fluorescente de haute intensité.

Récupérez la rate de souris et perturbez-la mécaniquement. Ajoutez un tampon de lyse pour éliminer les globules rouges et filtrer la suspension.

Centrifugez et remettez en suspension la pastille de cellule.

Triez les cellules à l’aide d’un trieur de cel