Un test d’adhérence en phase solide pour évaluer la formation de biofilm

Prenez une plaque multi-puits à fond plat avec des puits contenant des bactéries dans un milieu de croissance ou des bactéries dans un milieu de croissance complété par du sel biliaire.

Les sels biliaires induisent un stress, causant des dommages cellulaires et libérant de l’ADN et des protéines. Ces biomolécules recouvrent le fond des puits, permettant aux bactéries survivantes d’adhérer à la surface solide.

Les bactéries attachées se multiplient, formant des micro-colonies et produisant des auto-inducteurs - ou molécules de signalisation chimique, permettant la communication bactérienne.

Cette communication déclenche la colonisation des bactéries et initie la production de substances polymères extracellulaires ou EPS, générant un biofilm.

Après l’incubation, retirez le milieu pour éliminer les bactéries flottantes.

Introduisez une coloration violette cristalline qui interagit avec le peptidoglycane de la paroi cellulaire bactérienne, lui donnant une couleur violette.

Enlevez l’excès de teinture et séchez. Superposer avec de l’éthanol pour solubiliser le violet cristallin de la paroi cellulaire bactérienne, en changeant la couleur de la solution.

Une coloration plus intense dans l