Mesure de l’efficacité phagocytaire des macrophages avec la primaquine et la thérapie photodynamique

Commencez avec une plaque multi-puits contenant des macrophages murins collés - ou cellules immunitaires phagocytaires.

Introduire une suspension de cellules fongiques de Cryptococcus, interagissant avec les récepteurs des macrophages et s’internalisant par phagocytose.

Le phagosome fusionne avec le lysosome, formant un phagolysosome. L’environnement acide du phagolysosome favorise la survie et la multiplication des champignons.

Introduire une forte concentration de primaquine — un photosensibilisant — dans les puits d’essai, alors que le témoin n’a pas de photosensibilisateur. Incuber pour faciliter l’absorption de la primaquine par les macrophages.

Exposez la plaque à la lumière ultraviolette pour un traitement photodynamique ou PDT.

Dans le puits d’essai, la primaquine forme des cations radicaux qui interagissent avec l’oxygène moléculaire, produisant des espèces réactives de l’oxygène, ou ROS.

Les ROS induisent la mort fongique, tandis que les enzymes antioxydantes des macrophages neutralisent les ROS, prévenant ainsi les dommages cellulaires.

Perméabiliser les macrophages, libérant des cellules fongiques.

Répartissez le contenu cellulaire dilué sur des plaques de gélose sélect