Un test pour étudier l’impact d’un traitement photodynamique avec un photosensibilisateur sur l’activité métabolique des macrophages

Prenez une plaque multi-puits contenant des macrophages adhérents.

Ajouter un photosensibilisant d’essai dilué en série dans les puits d’essai. Le puits de contrôle manque de photosensibilisateur.

Incuber pour l’absorption cellulaire du photosensibilisateur.

Exposez la plaque à la lumière UV, appelée traitement photodynamique, ou PDT, pendant une durée spécifiée.

Dans les puits d’essai, les photosensibilisants à l’intérieur des macrophages absorbent la lumière UV et deviennent excités.

Ces photosensibilisants excités réagissent avec l’oxygène moléculaire, formant des espèces réactives de l’oxygène, ou ROS, et provoquant une toxicité cellulaire.

Pour contrer cela, les enzymes antioxydantes cellulaires, notamment la superoxyde dismutase et la catalase, neutralisent les ROS, prévenant ainsi les dommages oxydatifs cellulaires.

Ajoutez le réactif XTT, un sel de tétrazolium et un réactif de couplage d’électrons dans les puits d’essai et de contrôle. Couver.

Dans les cellules métaboliquement actives, le système de transport d’électrons de la membrane transplasmique transfère les électrons du NADH mitochondrial au réactif de couplage d’électrons, réduisant XTT en un produit de formazan ora