Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 5:43 min • January 15th, 2026
Prenez une STop And Go Extraction ou STAGE Tip, une colonne de purification miniaturisée.
L’embout contient de petites billes de silice liées à de longues chaînes d’hydrocarbures pour la purification peptidique basée sur l’interaction hydrophobe.
Laver avec des tampons contenant un pourcentage élevé d’acétonitrile, en éliminant les impuretés de la résine.
Introduisez un tampon de liaison et une centrifugeuse, équilibrant la colonne pour une liaison optimale des peptides.
Chargez un échantillon peptidique prédigéré obtenu à partir de cellules différenciées de type neutrophile, contenant des fragments de peptides et des impuretés, y compris des sels.
Centrifugeuse pour faire passer l’échantillon à travers la colonne. Les fragments peptidiques se lient aux chaînes d’hydrocarbures par des interactions hydrophobes, tandis que les sels sont éliminés.
Ajoutez le tampon de liaison et centrifugez, en éliminant les impuretés restantes.
Introduire le tampon à haute teneur en acétonitrile pour l’élution.
À l’aide d’une seringue, faites passer le tampon dans la colonne. L’acétonitrile se lie aux chaînes d’hydrocarbures, déplaçant les fragments de peptides qui s’éluent avec le tampon.
Effectuer
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques