Amélioration de la transduction virale dans les cellules tueuses naturelles à l’aide d’un polymère cationique

Prenez les cellules tueuses naturelles, ou NK. Ajoutez des vecteurs lentiviraux comprenant des enzymes virales et des molécules d’ARN modifiées qui codent pour une protéine fluorescente.

Ajoutez des polymères cationiques et sédimentez les cellules et les virus.

Les polymères neutralisent les charges négatives à la fois sur le virus et sur la cellule, facilitant ainsi la fusion membranaire.

L’ARN est transcrit inversement dans l’ADN et intégré dans le génome de l’hôte, permettant l’expression des protéines fluorescentes.

Ajoutez un milieu complété par la cytokine interleukine-2, ou IL-2.

L’IL-2 déclenche une signalisation intracellulaire qui favorise la survie et la prolifération des cellules NK tout en préservant l’expression des transgènes.

Transférez le mélange dans un puits recouvert d’anticorps qui se lient à des immunorécepteurs spécifiques sur les cellules NK, les déclenchant pour libérer des cytokines antivirales.

Quantifier les cytokines libérées pour évaluer l’impact du polymère sur la production de cytokines.

Ajoutez des colorants fluorescents pour marquer l’ADN des cellules nécrotiques.

À l’aide de la cytométrie en flux, identifiez les cellules vivantes et quantifiez le