Une thérapie adjuvante dans un modèle murin avec une tumeur sous-cutanée incomplètement réséquée

Commencez avec une souris anesthésiée portant une tumeur sous-cutanée.

Dans ce microenvironnement tumoral, les cellules T régulatrices expriment une protéine anti-cytotoxique qui interagit fortement avec CD80 sur les cellules présentatrices d’antigènes ou APC, empêchant ainsi l’interaction conventionnelle des lymphocytes T.

Désinfectez la zone chirurgicale et faites une incision cutanée près de la tumeur.

Ouvrez la plaie pour exposer la tumeur et coupez-la partiellement, en laissant des restes de tissu tumoral.

Fermez la plaie et laissez la souris récupérer.

Après l’opération, prendre une seringue remplie d’anticorps spécifiques à la protéine anticytotoxique et les injecter par voie intrapéritonéale dans la souris anesthésiée pour un traitement adjuvant ou supplémentaire.

Ces anticorps se déplacent vers le site de la tumeur et se lient aux protéines anticytotoxiques des cellules T régulatrices, bloquant ainsi leur fonction.

Cela permet aux APC d’interagir avec les lymphocytes T, les activant pour libérer des molécules cytotoxiques.

Ces molécules tuent les cellules tumorales restantes, réduisant potentiellement la repousse tumorale, suggérant un traitement adjuvant efficace.

Commencez cette chirurgie en écouvillonnant la zone chirurgicale avec de la chlorhexidine. À l’aide d’une pince et d’une paire de ciseaux, faites une incision droite d’un centimètre le long de la face dorsale, à 3 millimètres de la tumeur.

Ne coupez pas la peau recouvrant directement la tumeur, car elle ne guérira pas bien. Évitez d’utiliser un scalpel pour couper la tumeur et utilisez une pince à épiler pour ramasser les morceaux.

À l’aide d’une pince à épiler, retirez le fascia et le tissu adipeux sous-cutané entre la tumeur et le péritoine. La tumeur sous-cutanée est normalement attachée au côté de la peau.

Ouvrez la plaie en tenant doucement la peau du côté porteur de la tumeur à l’aide d’une pince à épiler, et inversez la tumeur de manière à ce qu’elle soit visible à l’extérieur. À l’aide d’une paire de ciseaux, coupez la capsule tumorale de la moitié pour la retirer, en commençant par la base de la tumeur, la plus proche de l’ouverture.

Pour une chirurgie de réduction de 50 %, coupez au milieu de la tumeur. À l’aide d’une pince incurvée, ramassez la section de la tumeur à enlever. Ramassez les restes de la zone débulkée. Pour une réduction de la tumeur de 75 %, commencez par effectuer une réduction de la tumeur de 50 %. Ensuite, coupez en deux les 50 % restants de la tumeur. Ramassez 25 % de la tumeur à l’aide d’une pince incurvée.

Pour fermer le site chirurgical, replacez la tumeur restante sous la peau et, à l’aide d’une pince, rapprochez les lambeaux de peau et alignez la peau le long de la plaie. Maintenez la peau ensemble, à 5 millimètres du bord de la plaie, et utilisez des clips chirurgicaux pour fermer la plaie, en commençant par le côté le plus proche de la pince.

Appliquez autant de clips que nécessaire pour vous assurer qu’aucun tissu sous-jacent n’est exposé. Généralement, 3 à 4 clips sont appliqués, avec des espaces de 2 millimètres entre les clips. Laissez les souris récupérer en les plaçant dans la chambre de chauffe chaude. Placez la cage de la souris sur le coussin chauffant.

Surveillez les souris dans la chambre de chauffe jusqu’à ce qu’elles se soient remises de l’anesthésique. Ensuite, remettez les souris dans la cage. Laissez la cage sur le coussin chauffant pendant 10 minutes supplémentaires, jusqu’à ce que les souris soient devenues plus actives. Donnez aux souris de la nourriture humide et molle. Surveillez les souris une heure après la chirurgie pour la récupération.

Surveillez à nouveau les souris à la fin de la journée et le lendemain matin, et assurez-vous que les clips restent en place. Traiter les souris en périopératoire avec un traitement adjuvant ou néoadjuvant à tout moment, en fonction du traitement d’intérêt. Par exemple, traitez les souris avec une dose de 100 microgrammes d’anti-CTLA-4 par voie intrapéritonéale le 15e jour après l’inoculation.