JoVE Encyclopedia of Experiments
Immunologie
0 vues • 3:35 min • July 8th, 2025
Commencez avec une souris anesthésiée, non obèse, diabétique et immunodéficiente qui manque de diverses cellules immunitaires.
La souris est prétraitée avec des anticorps pour bloquer les récepteurs de surface des neutrophiles et supprimer la réponse immunitaire.
Excisez la peau du dos de la souris sans endommager le tissu conjonctif et créez un lit de greffe.
Placez une peau humaine de double épaisseur, comprenant l’épiderme et une partie du derme, sur le lit de greffe, l’épiderme vers le haut.
Fixez-le avec de la colle et bandez-le pour minimiser les infections et restreindre le tissu du greffon.
Pendant la récupération, le tissu greffé reçoit de l’oxygène et des nutriments de la peau de la souris, facilitant ainsi sa fixation.
Au fil du temps, des vaisseaux sanguins se développent entre la peau humaine et la peau de la souris.
Cela permet d’établir la circulation et l’infiltration des cellules immunitaires humaines, ce qui permet d’obtenir une greffe de peau humaine réussie dans le modèle murin.
Après avoir transféré la souris au poste opératoire, stérilisez la zone chirurgicale et placez une pellicule plastique stérile sur la souris. Découpez une fenêtre dans le plastique légèrement plus grande que la taille de la zone à greffer.
Maintenez fermement la peau du donneur en place avec le dos de la pince et coupez une partie de la peau du donneur en forme de rectangle de 10 x 10 millimètres à greffer le long de la pince avec un scalpel. Éloignez la peau du corps pour éviter de couper profondément le fascia. Pour créer un lit de greffe, coupez une zone rectangulaire de peau de souris, correspondant à la taille du morceau de peau du donneur.
Ensuite, placez le morceau de peau du donneur avec l’épiderme vers le haut sur le lit de greffe préparé. À l’aide de l’arrière de la pince, manipulez la peau en la faisant glisser d’avant en arrière jusqu’à ce que la peau du donneur repose complètement à plat contre le lit de greffe.
Ajoutez des gouttes adhésives pour tissu de colle chirurgicale à l’endroit où la peau du donneur rencontre la peau de la souris et de la souris et du donneur et maintenez la peau de la souris et du donneur ensemble avec une pince pendant une à deux secondes pour que la colle adhère aux tissus. Scellez complètement le bord de la greffe et laissez la colle sécher complètement.
Ensuite, coupez de la gaze de vaseline suffisamment grande pour couvrir complètement la zone de greffe. Couvrez le greffon avec la gaze de vaseline et appuyez légèrement la gaze contre la peau à l’aide d’une pince. Coupez une bande d’un film transparent dans le sens de la longueur de manière à ce que la largeur soit suffisamment grande pour couvrir la blessure de la souris.
Appuyez fermement sur le pansement transparent avec le côté adhésif vers le bas sur la gaze. Roulez rapidement la souris pour enrouler complètement le pansement autour du torse, en vous assurant qu’il est bien ajusté sans entraver la respiration et que tous les membres sont libres de mouvement.
Après avoir placé la souris dans une cage de récupération, surveillez-la jusqu’à ce qu’elle soit alerte et qu’elle se déplace. Fournir une source de chaleur sur la partie de la cage pendant au moins 15 minutes après la récupération.