Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:44 min • July 8th, 2025
Prenez deux cuvettes d’électroporation. Une cuvette contient un petit ARN interférent, ou siRNA, conçu pour inhiber la production de FIP200, une protéine induisant l’autophagie.
La deuxième cuvette contient un siRNA brouillé comme contrôle qui n’inhibe pas la production de FIP200.
Ajoutez des cellules dendritiques immatures, ou iDCs ; électroporate pour l’entrée cellulaire de siRNA, puis plaquez les cellules.
Le siRNA internalisé se lie à un complexe de silençage induisant l’ARN.
Le complexe avec le siRNA spécifique de FIP200 clive son ARNm cible, inhibant la production de FIP200, tandis que les iDC de contrôle traités par siRNA produisent FIP200.
Récoltez les cellules et ajoutez-y le virus de l’herpès simplex. Lors de la fusion de l’enveloppe virale et de la membrane cellulaire, l’ADN libéré pénètre dans le noyau et conduit à la production de protéines virales et de nucléocapsides.
Les protéines virales perturbent les lamines nucléaires. FIP200 forme un complexe qui déclenche une cascade de signalisation, induisant l’autophagie des lamines perturbées pour les cibler pour la dégradation et facilitant l’échappement des nucléocapsides virales dans le cytoplasme.
L’inhibition de la pr
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