Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:42 min • July 8th, 2025
Prenez des vecteurs rétroviraux mélangés à des cellules primaires de la rate.
Les vecteurs contiennent de l’ARN transgénique codant pour un récepteur antigénique chimérique ou CAR, qui cible un antigène spécifique de la tumeur.
La cytokine interleukine-2 dans le milieu favorise sélectivement la prolifération des lymphocytes T tandis que les autres cellules finissent par mourir.
Transférez le mélange dans une microplaque recouverte de fragments de fibronectine recombinante.
Centrifuger pour faciliter la liaison des fragments de fibronectine aux vecteurs et aux lymphocytes T, médiant l’interaction virus-cellule hôte, et incuber.
Lors de la fusion de l’enveloppe des vecteurs avec la membrane cellulaire, les enzymes virales transcrivent inversement l’ARN libéré en ADN et l’incorporent dans le génome de l’hôte.
Les lymphocytes T transduits expriment des CAR liés à la surface, constitués d’un fragment variable d’anticorps extracellulaire ciblant l’antigène spécifique de la tumeur et les régions de signalisation intracellulaire pour répondre à l’antigène.
Remettez les cellules en suspension avant de les transférer dans un tube.
Centrifuger pour éliminer le surnageant contenant des virus n
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