Génération d’un modèle ex vivo de peau blessée ovine infectée par un pathogène bactérien
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:13 min • July 8th, 2025
Faites une biopsie cutanée pré-stérilisée prélevée sur le front d’un agneau dans un milieu sans antibiotiques.
La section comprend un épiderme externe et une couche de derme sous-jacente.
Retirez le milieu et utilisez un tampon pour laver la section.
Faites une coupe circulaire dans la section et retirez la couche supérieure. Cela brise la barrière, générant un lit de plaie dans la peau.
Transférez les sections blessées sur un insert de membrane perméable dans une plaque multipuits contenant un milieu sans antibiotique.
Introduire une suspension de bactéries pathogènes sur le lit de la plaie et incuber.
Pendant l’incubation, le lit de la plaie fournit une surface tissulaire pour la fixation des bactéries et les nutriments pour soutenir la croissance bactérienne.
Cela permet la multiplication et la propagation des bactéries à travers le lit de la plaie, établissant une infection.
Pour infecter l’échantillon de peau, préparez une plaque fraîche à 24 puits avec 400 microlitres de milieu préchauffé sans antibiotique, et ajoutez les inserts à 24 puits à l’aide d’une pince stérile. Retirez le milieu des échantillons de peau, lavez-les avec 500 microlitres de PBS stérile et retirez le lav
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