Un modèle de co-culture tridimensionnelle de lymphocytes T infiltrants dans des sphéroïdes tumoraux

Commencez par une plaque de culture contenant un moulage d’agarose. La fonte comprend une chambre d’ensemencement avec plusieurs micropuits.

Chaque micropuits contient un sphéroïde tumoral dans un milieu de culture. Les sphéroïdes sont des agrégats tridimensionnels de cellules tumorales.

Tout d’abord, retirez le milieu entourant le moulage de l’agarose. Ensuite, retirez le milieu à l’intérieur du plâtre d’un coin de la chambre d’ensemencement pour éviter la perte de sphéroïdes.

Introduisez une suspension de lymphocytes T spécifiques de la tumeur goutte à goutte dans la chambre d’ensemencement, permettant aux cellules de s’installer dans les micropuits contenant les sphéroïdes.

Ensuite, ajoutez un milieu de culture autour de la fonte d’agarose et incubez la plaque dans des conditions physiologiques pour développer une co-culture.

Pendant l’incubation, les lymphocytes T entourent le sphéroïde. Un sous-ensemble de lymphocytes T s’infiltre dans le sphéroïde, tandis que d’autres restent à la périphérie, établissant un modèle de co-culture tridimensionnel.

Pour mettre en place une co-culture de lymphocytes T, remettez en suspension le nombre approprié de lymphocytes T dans 190 microlitre