Un test in vitro pour évaluer l’activité antitumorale des cellules CAR-T spécifiques de la tumeur
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:42 min • July 8th, 2025
Prenez une plaque multipuits contenant des cellules tumorales de lymphome à cellules B exprimant un antigène de surface spécifique des cellules B et une enzyme cytoplasmique luciférase.
Introduire des cellules CAR-T dans des puits sélectionnés et incuber. Les cellules expriment des récepteurs antigéniques chimériques, ou CAR, comprenant un domaine extracellulaire ciblant l’antigène tumoral et les domaines de signalisation intracellulaires.
Le CAR se lie à l’antigène tumoral, induisant l’activation des cellules CAR-T.
Les cellules activées libèrent des cytokines qui favorisent l’activité antitumorale des cellules, déclenchant la libération de toxines.
Les toxines pénètrent dans les cellules tumorales et induisent la mort cellulaire.
Faites tourner les cellules et isolez le surnageant. Quantifier les cytokines pour évaluer l’activité des cellules CAR-T.
Remettre les cellules en suspension dans un tampon contenant de la luciférine, un substrat bioluminescent.
À l’entrée, la luciférine est oxydée par la luciférase dans les cellules tumorales vivantes, émettant de la lumière.
Mesurer la bioluminescence pour identifier une diminution du signal dans les cellules tumorales traitées, confir
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