Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:55 min • July 8th, 2025
Prenez une plaque multi-puits contenant des cellules tueuses naturelles, ou NK, et des cellules cancéreuses. Les puits de contrôle ne contiennent que des cellules cancéreuses.
Centrifugeuse pour faciliter le contact cellulaire.
couver. Les récepteurs activateurs des cellules NK se lient aux ligands de surface des cellules cancéreuses, ce qui déclenche la libération de granules contenant des molécules cytotoxiques.
Ces molécules créent des pores de membrane cellulaire cancéreuse et induisent l’apoptose, libérant du contenu intracellulaire, y compris la lactate déshydrogénase, ou LDH.
Ajoutez un détergent pour lyser les cellules cancéreuses dans les puits de contrôle pour une libération maximale de LDH.
Centrifuger et transférer une partie des surnageants contenant de la LDH dans une plaque de dosage.
Ajouter le réactif de dosage et incuber.
La LDH convertit le lactate en pyruvate, réduisant le NAD+. La diaphorase utilise le NADH pour réduire le sel de tétrazolium, formant un produit de formazan de couleur rouge.
Ajoutez une solution acide pour arrêter la réaction enzymatique.
Utilisez un lecteur de microplaques pour mesurer l’absorbance du formazan dans les puits.
L’intensité du for
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