Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:43 min • July 8th, 2025
Commencez avec une solution de polymère congelée contenant des polymères chargés positivement.
Décongeler la solution polymère jusqu’à ce qu’elle atteigne la température ambiante.
Ajouter un tampon et un vortex pour un mélange uniforme, générant une solution homogène.
Introduire l’ARNm cible dans la solution polymère dans un rapport égal pour une réaction optimale.
Incuber pour permettre aux polymères chargés positivement d’interagir avec les groupes phosphate chargés négativement dans l’ARNm via des interactions électrostatiques.
Cela facilite l’incorporation de l’ARNm dans la structure du polymère, formant des nanoparticules de complexes ARNm-polymères ou de polyplexes.
Transférez ces polyplexes dans un tube contenant de l’eau sans RNase.
Mélangez-les et laissez la précipitation des polyplexes.
Introduisez un tampon contenant du saccharose et congelez-le. Le saccharose agit comme un cryoprotecteur qui maintient l’intégrité structurelle des polyplexes.
Ensuite, effectuez une lyophilisation, pour éliminer toute trace d’eau.
Conservez-le à basse température en tant que candidat vaccin à ARNm pour une utilisation future.
Pour la formation de polyplexes, décongelez les polymères précé
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