Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:20 min • July 8th, 2025
Commencez par une culture de cellules souches de moelle osseuse.
Introduisez le tampon trypsine-EDTA pour détacher les cellules et briser les amas cellulaires, formant une suspension unicellulaire.
Centrifugez, puis retirez le surnageant. Remettez le granulé en suspension avec un milieu frais.
Transférez la suspension dans une seringue et connectez-la à une unité de filtre à membrane.
Poussez le piston et jetez le fluide contenant le filtrat.
Détachez le filtre. Remplissez la seringue avec un produit frais. Connectez à nouveau le filtre et poussez rapidement le piston.
La pression du liquide force la cellule vers les pores du filtre.
Cela produit une vésicule sphérique à membrane plasmique ou PMV.
Ces vésicules contiennent des composants cellulaires et des organites entourés par la membrane.
Examinez le filtrat à l’aide d’un microscope à contraste de phase inversé pour observer les vésicules sphériques translucides.
Les dimensions des vésicules correspondent à la taille des pores de la membrane filtrante, ce qui confirme la génération de VP.
Pour générer les PMV, il faut d’abord cultiver des PMSC de souris dans un milieu de culture DMEM complet dans un puits d’une plaque à six puit
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques