Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:12 min • July 8th, 2025
Commencer par une suspension de Mycobacterium bovis BCG, traitée avec un tensioactif non ionique, pour éviter l’agglutination bactérienne.
Ensuite, ajoutez un réactif de biotinylation et incuber.
Ce réactif de biotinylation, un complexe de biotine complexé à un linker fonctionnel, facilite la liaison des molécules de biotine aux protéines de surface bactériennes, marquant ainsi les bactéries.
Après l’incubation, centrifuger la suspension bactérienne marquée à la biotine pour éliminer le réactif de biotinylation n’ayant pas réagi.
Remettez les bactéries en suspension dans un tampon. Ajouter une solution de protéine de fusion d’avidine, une protéine recombinante comprenant un domaine antigénique cible fusionné à de l’avidine monomère.
Pendant l’incubation, l’avidine se lie à la biotine, facilitant la modification de la surface bactérienne avec les antigènes cibles.
Centrifuger la suspension pour éliminer les protéines de fusion non liées.
Remettre en suspension les bactéries enrobées d’antigène dans un tampon contenant un tensioactif non ionique. L’enrobage antigénique de la bactérie peut améliorer sa propriété à déclencher des réponses immunitaires.
Travailler dans une enceinte de b
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques