Immunisation intradermique avec des sporozoïtes vivants atténués dans un modèle murin

Commencez avec une souris anesthésiée sous un stéréomicroscope, avec le dessous de l’une des oreilles de la souris fixé sur la scène à l’aide d’un ruban adhésif.

Les yeux sont enduits d’une pommade pour éviter qu’ils ne se dessèchent.

Apportez une seringue chargée du stade sporozoïte de Plasmodium, un parasite du paludisme. Les sporozoïtes vivants sont atténués par les radiations pour les rendre non infectieux.

À l’aide du stéréomicroscope, injecter dans la partie supérieure de l’oreille, en pénétrant dans la couche la plus externe de l’épiderme et en libérant les sporozoïtes dans le derme.

Maintenez l’aiguille en place brièvement pour éviter le reflux de la suspension injectée avant de la retirer.

Un gonflement visible au site d’injection, appelé papule, confirme que l’injection a réussi.

Effectuez plusieurs injections dans la même oreille.

Relâchez l’oreille injectée et répétez les injections dans l’autre oreille.

Après l’injection, laissez la souris récupérer.

Les sporozoïtes injectés déclenchent une réponse immunitaire, amorçant le système immunitaire contre le parasite.

Avant d’injecter les sporozoïtes, confirmez le niveau approprié de sédation de l’animal de laboratoire par pincement des orteils et appliquez une pommade oculaire pour prévenir le dessèchement de la cornée. Ensuite, en travaillant rapidement, utilisez du ruban adhésif transparent pour fixer doucement la face ventrale du pavillon de l’oreille sous un stéréomicroscope, et chargez une seringue de 10 microlitres équipée d’une aiguille de calibre 35 avec 0,6 microlitre de parasites en suspension.

Ensuite, insérez soigneusement l’aiguille, côté biseau vers le haut, sous l’épiderme sur le côté dorsal de l’oreille, et injectez 0,15 microlitre de sporozoïtes dans le site. Une papule caractéristique sera observée au site d’injection. Après avoir injecté le derme trois fois de plus, comme nous venons de le démontrer, retirez soigneusement le ruban adhésif et surveillez la souris jusqu’à ce qu’elle soit complètement rétablie.