Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 7:00 min • July 8th, 2025
Prenez une microplaque recouverte d’une matrice extracellulaire et ajoutez-y des cellules souches pluripotentes humaines en suspension dans un milieu de différenciation.
Le milieu contient des molécules de signalisation qui influencent les voies de signalisation cellulaires, dirigeant la différenciation en cellules progénitrices neurales.
Introduire un autre milieu de différenciation contenant des molécules de signalisation qui induisent la différenciation en cellules de crête neurale, ou NCC, précurseurs des cellules neuronales et non neuronales.
Ajoutez des enzymes pour perturber la matrice, dissociant ainsi les cellules.
Laver pour neutraliser les enzymes, puis centrifuger et jeter le surnageant. Remettre les CNC en suspension dans un milieu sphéroïde et les transférer sur une microplaque.
Les facteurs de croissance et les petites molécules du milieu induisent la formation de sphéroïdes.
Complétez avec de l’acide rétinoïque, qui favorise la différenciation en neurones progéniteurs sympathiques.
Transférez le sphéroïde sur une microplaque enrobée de protéine d’adhésion dans un milieu de maturation de neurones sympathiques, provoquant la fixation du sphéroïde.
Les facteurs de croi
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