Génération d’organoïdes cérébraux dérivés de cellules souches pluripotentes induites
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:44 min • July 8th, 2025
Prenez des colonies de cellules souches pluripotentes induites, ou iPSC, cultivées sur une matrice de support.
Ajouter une solution contenant des enzymes pour dissocier les colonies en cellules uniques.
Transférez les cellules dans un tube, centrifugez-les et jetez le surnageant.
Remettez les iPSC en suspension dans un milieu de croissance.
Transférez les cellules dans une microplaque contenant des fibres polymères biocompatibles.
Centrifugeuse pour agréger de force les iPSC, formant des corps embryoïdes, ou EB, sur l’échafaudage polymère.
Transition vers un milieu d’induction neurale qui favorise la prolifération et la différenciation des iPSC en cellules souches neurales, cellules progénitrices et neurones immatures.
Lors de l’incubation, les cellules s’auto-organisent.
Placez les corps embryoïdes sur une feuille alvéolée et ajoutez-y des gouttes contenant des protéines de la matrice extracellulaire.
Incuber pour solidifier la matrice, en intégrant les EB.
Transférez les EB dans une microplaque contenant un milieu de maintenance neurale. Couver.
Les EB subissent une prolifération cellulaire pour former des protubérances et des bourgeonnements et se différencier en neurones mature
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