Isolement de la microglie du cortex d’un cerveau de souris adulte
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:48 min • July 8th, 2025
Prenez un cortex cérébral de souris fraîchement récolté.
Coupez le tissu en petits fragments. Transférez-les dans un homogénéisateur réfrigéré contenant un tampon contenant des inhibiteurs de RNase et des DNases.
Homogénéiser le tissu de manière optimale pour libérer les cellules en suspension, en préservant sélectivement la microglie en raison de sa capacité à résister aux forces de cisaillement et à maintenir la viabilité de la membrane, tout en éliminant les neurones et autres cellules gliales.
De plus, les inhibiteurs de la RNase dégradent les RNases, tandis que les DNases dégradent tout ADN contaminant.
Passez la suspension cellulaire à travers une crépine cellulaire pour éliminer les débris tissulaires.
Transférez la suspension cellulaire dans un tube. Centrifugez et retirez le surnageant contenant des enzymes. Remettez les cellules en suspension dans une mémoire tampon.
Ajouter des microbilles magnétiques anti-myéline. Ces microbilles ciblent la protéine de myéline, liant les débris de myéline et les oligodendrocytes.
Chargez le mélange cellule-bille dans une colonne d’appauvrissement comprenant une matrice avec des sphères ferromagnétiques.
Sous le champ magnétique appliqué
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques