Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:51 min • July 8th, 2025
Coupez un cortex de souris en petits morceaux et transférez-le dans un milieu de dissection froid contenant une solution saline tamponnée.
Ajouter des enzymes digestives pour dissocier la matrice extracellulaire.
Pour éliminer les enzymes résiduelles, laver avec le milieu de dissection à froid.
Remplacez ce milieu par un milieu d’enrichissement en astrocytes.
Ensuite, utilisez une pipette pour dissocier les morceaux de tissu.
Passer la suspension à travers une passoire pour éliminer les tissus non dissociés et obtenir des cellules uniques.
Transférez les cellules sur une plaque recouverte de polymère chargée positivement. Incuber en secouant.
Les astrocytes adhèrent fermement, tandis que les neurones faiblement liés, la microglie et les oligodendrocytes se détachent.
Le milieu d’enrichissement convertit les astrocytes matures en astrocytes polygonaux diviseurs.
Retirez les cellules détachées et lavez les astrocytes avec un tampon de phosphate.
Ajoutez des enzymes digestives pour détacher les astrocytes.
Ajoutez un milieu contenant du sérum pour arrêter l’activité enzymatique. Recueillez les astrocytes dans un tube et centrifugez.
Jetez le surnageant. Remettez les cellules en suspen
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