Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:33 min • July 8th, 2025
Prenez des cellules souches pluripotentes induites par l’homme ou hiPSC transduites, surexprimant la neurogénine-2, pilotée par le système inductible par l’antibiotique doxycycline.
Transférez-les dans les zones d’électrodes actives recouvertes de protéines d’adhésion dans les puits d’un réseau de microélectrodes multi-puits.
Laissez les hiPSC se fixer aux zones de l’électrode active enrobée.
Ajoutez un milieu complété par de la doxycycline, qui induit la surexpression de la neurogénine-2, un facteur de transcription spécifique aux neurones.
La neurogénine-2 déclenche des voies moléculaires et conduit à la différenciation des hiPSC en cellules précurseurs neurales, tandis que les constituants des milieux aident à la survie cellulaire.
Introduisez les astrocytes dans les puits du réseau de micro-électrodes, où ils adhèrent à la zone active de l’électrode.
Remplacez les milieux par des milieux neurobasaux contenant des facteurs de croissance neurogènes, de la doxycycline et un inhibiteur de la croissance cellulaire.
L’inhibiteur empêche la prolifération des astrocytes et élimine les hiPSC indifférenciées.
Au fil du temps, l’expression soutenue de la neurogénine-2 et les facteurs de c
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