Suivi du transport axonal d’organites dans les motoneurones à l’aide d’un dispositif microfluidique

Commencez par une chambre microfluidique recouverte de polymère avec des puits proximaux et distaux reliés par plusieurs microsillons.

Dans le puits proximal, placez les tissus embryonnaires de la moelle épinière de souris riches en motoneurones en développement.

Complétez bien cela avec un milieu nutritif. Incuber pour permettre la croissance des neurones et l’adhérence à la surface recouverte de polymère.

Plus tard, ajoutez un milieu nutritif sans facteur de croissance au puits proximal.

Dans les puits distals, ajoutez un volume plus élevé de milieu nutritif contenant des facteurs de croissance pour créer des différences de concentration et de volume.

Ces différences font que les axones, les projections neuronales les plus longues, se développent vers les puits distaux via les microsillons.

Ajoutez une solution de colorant fluorescent dans les deux puits.

Les molécules de colorant pénètrent dans les neurones et colorent les mitochondries et les organites acides aux deux extrémités.

Dans l’imagerie confocale en direct, les organites colorés par fluorescence se déplacent dans les deux sens entre les corps cellulaires neuronaux et les axones, confirmant le transport axonal dans les