Culture de neurones murins primaires compartimentée à l’aide de puces microfluidiques en plastique

Prenez une puce microfluidique en plastique comprenant des réservoirs et des compartiments somatiques, ainsi que des réservoirs et des compartiments axonaux, reliés par des microsillons.

Ajoutez une solution de pré-revêtement pour saturer les compartiments et les rainures, évitant ainsi le piégeage des bulles d’air.

Aspirez la solution en laissant les compartiments principaux remplis. Laver avec un tampon.

Enduire les puits d’un polymère synthétique qui facilite l’adhésion neuronale. Laver avec un tampon et ajouter un milieu de culture pour éviter que la puce ne sèche.

Pour ensemencer une suspension de neurones de l’hippocampe du rat, aspirez le média.

Chargez la suspension dans les réservoirs somatiques. Les neurones entrent et se fixent dans le compartiment somatique.

Ajouter des milieux de culture neuronale dans les puits et incuber. Les facteurs de croissance présents dans les milieux facilitent la croissance neuronale.

Peu à peu, les neurones étendent leurs axones, qui se développent dans le compartiment axonal à travers les microsillons.

L’étroitesse des sillons empêche l’entrée des corps cellulaires neuronaux, assurant la séparation physique des régions somatiques et axonale