Génération de cellules neuronales à partir de cellules souches pluripotentes dérivées du sang

Prenez une microplaque avec des lamelles en verre placée au fond des puits.

Introduisez un polymère chargé positivement pour recouvrir les lamelles et lavez-les pour enlever tout polymère non lié. Traiter avec une protéine de matrice extracellulaire pour enrober les lamelles et aspirer les protéines non liées.

Le revêtement agit comme un substrat de culture qui facilite l’adhésion cellulaire.

Ajoutez un milieu d’induction dans les puits et introduisez une suspension de cellules souches pluripotentes dérivées du sang, ou BD-PSC. Ces cellules, capables de se différencier en différents types de cellules, sont générées par la reprogrammation des cellules progénitrices sanguines.

Incuber pour que les cellules adhèrent au substrat. Les facteurs de croissance et les nutriments dans le milieu d’induction transforment les BD-PSC en cellules progénitrices neurales.

Introduire un milieu de différenciation contenant des facteurs de croissance neuronale et incuber, déclenchant la différenciation des progéniteurs neuronaux en un phénotype neuronal, présentant des processus cellulaires étendus et des contacts cellule-cellule.

Placez les lamelles en verre dans des plaques à 4 puits et enduisez-les