Préparation de cultures en tranches flottantes à partir d’un cerveau humain adulte

Prenez un tissu cérébral humain immergé dans une solution de tranchage. Le pH biologique et les nutriments de la solution aident à maintenir la fonctionnalité des tissus.

Retirez la couche externe des méninges et coupez le tissu pour créer une surface plane.

Épongez l’excès de solution du tissu. Fixez le tissu coupé à un disque d’échantillon à l’aide d’un bloc d’agarose, en gardant le tissu en contact avec le bloc pour faciliter la section.

Placez le disque dans un bac tampon vibrante et recouvrez le mouchoir d’une solution de tranchage glacée.

À l’aide du vibratome, générez des tranches uniformes qui préservent l’architecture tissulaire.

Coupez l’excès de tissu, en assurant une proportion constante de matière grise et blanche.

Placez les tranches dans une plaque multipuits contenant un milieu de culture et incuberez.

Les tranches restent en suspension dans le milieu pour assurer un accès uniforme aux nutriments, une technique connue sous le nom de culture de tranches flottantes.

Reconstituez régulièrement la culture avec un milieu supplémenté en facteur de croissance neurale pour maintenir la viabilité des tissus.

Transférez l’échantillon dans une boîte de Pétri contenant une solu