Préparation de coupes cérébrales à l’aide d’une méthode de récupération protectrice basée sur le NMDG
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:59 min • July 8th, 2025
Commençons par un cerveau isolé. Immergez rapidement le cerveau dans un liquide céphalo-rachidien artificiel pré-refroidi ou aCSF pour interrompre les processus métaboliques.
L’aCSF contient du NMDG, un gros cation organique qui réduit les lésions et la mort des cellules neuronales.
L’aCSF contient également de l’HEPES, qui maintient le pH et la concentration en sel et prévient le gonflement et les dommages cellulaires.
Transférez le cerveau dans une boîte de Pétri contenant un papier filtre.
Coupez le cerveau pour obtenir la région souhaitée.
Fixez le bloc cérébral dans le porte-échantillon à l’aide d’une colle appropriée et incrustez-le dans l’agarose.
Positionnez le porte-échantillon dans la trancheuse.
Remplissez le réservoir de la trancheuse avec l’aCSF pré-refroidi et aérez la solution pour assurer un apport optimal en oxygène.
Obtenez des sections du bloc cérébral.
Transférez les sections dans l’aCSF préchauffé pour redémarrer les processus métaboliques, permettant aux sections de récupérer.
Prélevez doucement le cerveau intact dans le bécher de NMDG-HEPES aCSF prérefroidi et laissez le cerveau refroidir uniformément pendant environ 1 minute. Maintenant, utilisez une grande
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques