Technique d’incubation prolongée du tissu neuronal de la rétine

Prenez un œil de souris intact dans du liquide céphalo-rachidien artificiel, ou aCSF, et incisez pour isoler l’œilleton contenant la rétine.

Traiter avec une solution enzymatique pour éliminer la membrane limitante interne, exposant les cellules neuronales.

Plongez le tissu dans une solution d’inhibition pour arrêter la digestion et lavez-le pour éliminer l’excès de solution.

Placez le tissu dans un incubateur spécialisé à basse température pour ralentir le métabolisme cellulaire, préservant ainsi le tissu.

Cet incubateur se compose d’une chambre principale avec un grillage pour le montage des tissus. La chambre est remplie d’aCSF, et sa température et son pH sont contrôlés pour préserver la fonctionnalité des tissus.

Pour éliminer la contamination microbienne, l’aCSF est pompé dans une autre chambre et traité avec un rayonnement ultraviolet pour tuer tous les microbes.

L’aCSF stérilisé est ensuite pompé dans la chambre principale.

Pour isoler la rétine, retirez l’œilleton, séparez la rétine des tissus environnants et remettez-la dans l’incubateur.

Pour la préparation du montage rétinien entier, énucléer immédiatement les yeux d’un animal euthanasié. Faites une petite incision le l