Isolement et culture de cellules souches neurales adultes de la zone sous-calleuse de souris
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:31 min • July 8th, 2025
Commençons avec un cerveau de souris sur une matrice cérébrale refroidie.
Obtenez des sections contenant la zone sous-calleuse ou SCZ. Transférez la section dans un tampon de phosphate froid.
À l’aide d’un microscope à dissection, découpez la partie SCZ.
Coupez la SCZ disséquée en petits morceaux.
Transférez ces morceaux dans un tampon de digestion. Incuber pour dissocier les cellules du tissu.
Centrifugez et jetez le surnageant. Remettez les cellules en suspension dans un milieu approprié.
Transférez les cellules dans une plaque de culture et ajoutez des facteurs de croissance spécifiques.
Les cellules souches neurales adultes se divisent, formant des amas appelés neurosphères.
Une mauvaise distribution des nutriments dans les amas de cellules limite la croissance cellulaire.
Pour disperser les grappes, centrifugez et jetez le surnageant. Remettez les grappes en suspension dans un tampon de dissociation et incuberez.
Pipetez la solution de haut en bas pour générer des cellules uniques.
Centrifugez et jetez le surnageant.
Remettre les cellules en suspension et les transférer dans un milieu adapté pour obtenir une monocouche.
Une fois disséqué, transférez le cerveau de la souris dan
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