Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
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Commencez par une coupe coronale postnatale du cerveau de souris contenant une région hippocampique ventrale, une zone située dans la région inférieure du cerveau.
Coupez le tissu ventral de l’hippocampe et transférez-le dans un milieu approprié.
Coupez le tissu en petits morceaux et laissez-les se fixer à une lamelle recouverte d’une matrice dans une plaque multipuits.
Les neurones du tissu commencent à étendre les projections.
Ensuite, prenez un noyau accumbens dérivé d’un embryon de souris, un petit tissu situé profondément à l’intérieur du cerveau antérieur.
Coupez le tissu du noyau accumbens en petits morceaux. Transférez-les dans un tube.
Ajouter des enzymes de digestion pour dissocier les protéines de la matrice extracellulaire. Laver pour réduire les niveaux d’enzymes.
Pipetez les morceaux de tissu de haut en bas pour générer des cellules uniques.
Centrifugez les cellules. Retirez le surnageant et remettez les cellules en suspension.
Ajoutez cette suspension à la lamelle avec les tissus ventraux de l’hippocampe et incubez.
Les terminaisons nerveuses du morceau de tissu ventral de l’hippocampe se connectent aux cellules neuronales du noyau accumbens, formant une jonction de
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