Etablissement d’une co-culture de cellules de pulpe dentaire et de neurones trijumeaux pour la communication croisée

Commencez par une suspension riche en cellules souches mésenchymateuses obtenue à partir de tissu pulpaire dentaire de souris.

Incuber pour permettre l’adhésion et la prolifération cellulaires, formant une monocouche.

Placez un insert de membrane poreuse recouvert de laminine dans le puits contenant les cellules de la pulpe dentaire.

Ensemencez l’insert avec un milieu de co-culture contenant des neurones trigéminaux dérivés du cerveau de la souris. Incuber pour permettre l’attachement des neurones.

Remplacer le milieu par un milieu de coculture contenant des régulateurs de croissance tels que l’uridine et la 5-fluoro-2 désoxyuridine.

Ces molécules pénètrent dans les cellules et contrôlent la croissance des cellules souches mésenchymateuses en proliférant activement en inhibant la synthèse de l’ADN.

Au fil du temps, les cellules mésenchymateuses sécrètent de petites molécules de signalisation qui traversent la membrane poreuse pour stimuler les neurones trijumeaux.

Cette stimulation provoque l’allongement des processus neuronaux des neurones trijumeaux vers les cellules mésenchymateuses. De plus, les neurones sécrètent des molécules de signalisation, permettant la communication croi