Etablissement d’une tumeur cérébrale dans un modèle de co-culture en coupe organotypique

Commencez par une tranche de cerveau de souris incrustée d’agarose.

Placez la tranche de cerveau sur un insert de membrane contenant un milieu de culture.

Immergez la tranche pour assurer une exposition uniforme aux nutriments.

Prélevez un petit volume du milieu de l’insert et transférez-le au fond du puits.

Retirez l’excédent de fluide de l’insert.

Transférez l’insert dans une boîte de Pétri contenant le milieu de culture.

Retirez soigneusement les bords de l’agarose de la tranche pour la rendre accessible pour les interactions ultérieures.

Placez l’insert dans un nouveau puits contenant le milieu de culture et incubez-le pour faciliter la récupération des tranches.

Ajoutez des cellules tumorales cérébrales humaines à la tranche et incuberez.

Les cellules tumorales interagissent avec les cellules cérébrales et le microenvironnement à l’intérieur de la tranche, initiant la multiplication et établissant un modèle de co-culture 3D.

À l’aide d’une écumoire, placez une tranche de cerveau dans le support sur l’insert et appuyez doucement sur la tranche pour qu’elle soit complètement immergée. Répétez la procédure pour toutes les tranches. Ensuite, prélevez un millilitre de milieu de cul