Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:42 min • July 8th, 2025
Prenez une microplaque avec une culture adhérente de cellules gliales dérivées d’un cerveau de rat. La culture contient des astrocytes, des microglies et des oligodendrocytes.
Retirez le milieu, incubez avec une solution enzymatique pour détacher les cellules, puis transférez-les dans un tube.
Centrifugez et retirez le surnageant avec des débris cellulaires. Remettez les cellules en suspension dans un milieu chaud.
Triturer à l’aide d’une seringue pour briser les amas cellulaires et filtrer à l’aide d’une passoire pour obtenir une suspension unicellulaire.
Ajoutez un biopolymère photoréticulable, des agents de réticulation et des composants de matrice extracellulaire.
Versez le mélange dans un moule fixé à une lamelle. Exposez le mélange à une lumière de haute intensité pour induire la réticulation, la formation d’un gel et l’encapsulation des cellules gliales.
Retirez le moule et placez les lamelles dans une microplaque. Ajoutez un milieu chaud et incubez le gel dans des conditions physiologiques.
Les cellules prolifèrent dans la matrice extracellulaire de soutien et créent un réseau cellulaire, établissant une culture tridimensionnelle de cellules gliales.
24 heures avant l’encap
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