Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:26 min • July 8th, 2025
Prenez une plaque multipuits recouverte d’un tensioactif pour réduire la tension superficielle du puits.
Ajoutez le rapport souhaité d’astrocytes et de neurones dans un milieu de culture approprié.
Centrifuger pour décanter les cellules puis incuber.
La faible tension superficielle empêche les cellules de coller à la surface du puits, provoquant leur agrégation.
Les cellules adhèrent les unes aux autres par le biais de diverses interactions membranaires, y compris des molécules d’adhésion, formant une sphère de coculture 3D.
Récupérez les sphères et transférez-les dans un tube.
Laissez les sphères se déposer. Retirer le surnageant et ajouter du milieu de culture frais.
Transférez les sphères dans une fiole tournante contenant un milieu de croissance approprié et incubez en essorant constamment.
Dans la sphère, les neurones étendent les projections les unes vers les autres, formant une jonction appelée synapse, tandis que l’astrocyte s’étend vers la synapse, établissant une association étroite avec les neurones.
Ajoutez le rapport souhaité de hAstros dissociés et de hNeurones ou iNeurones dans un volume total de deux millilitres à chaque puits d’une microplaque. Centrifugez la plaqu
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